CONSERVAÇÃO E DETERMINAÇÃO DA VIABILIDADE DE GRÃO
DE PÓLEN DE MILHO
CLARISSA ALVES FERREIRA1, ÉDILA VILELA DE REZENDE VON PINHO2, PATRÍCIA DE OLIVEIRA ALVIM3 , VINÍCIUS DE ANDRADE4 , TANISMARE TATIANA DE ALMEIDA SILVA5
e DEISY LÚCIA CARDOSO6
1Eng. Agrônoma, M.Sc., aluna do Programa de Pós Graduação em Agronomia da UFLA. Rua Afonso Pena, 250, Ignacio Valentini, CEP 37200-000, Lavras, MG. Fone: (35) 3821-5933 e (35)9821-9642. E-mail: clarissaaf04@yahoo.com.br (autora para correspondência)
2Eng. Agrônoma, Dra., Professora adjunta do Departamento de Agricultura da UFLA, Caixa Postal 3037, CEP 37200-000, Lavras, MG. E-mail: edila@ufla.br
3 Eng. Agrônoma, M.Sc., aluna do Programa de Pós Graduação em Agronomia da UFLA. Caixa postal 3037, CEP 37200-00, Lavras, MG. E-mail: patriciadeoliveiraalvim@yahoo.com.br
4 Eng. Agrônomo, R. Eduardo Gomes, 84, Bairro Vila Nova, CEP 37260000, Perdoes, MG. Email: vinicius@shsnet.com.br
5 Eng. Agrônoma, MSc., aluna do Programa de Pós Graduação em Agronomia da UFLA, Caixa Postal 3037, CEP 37200-000, Lavras, MG. Email: mareagro@bol.com.br
6 Eng. Agrônoma, MSc., aluna do Programa de Pós Graduação em Genética e Melhoramento de Plantas da UENF “Darcy Ribeiro”, Av. Alberto Lamego, 637, Bl 06, apto 002, B. Horto, CEP 28016 – 81, Campos dos Goytacazes, RJ. Email: deisycardoso@hotmail.com
RESUMO - Em programas de melhoramento de milho, fatores relacionados à duração do tempo de receptividade do estigma, longevidade do grão de pólen na planta, diferenças no período de florescimento entre plantas e conservação dos recursos genéticos são alguns aspectos que reforçam a importância do armazenamento de grãos de pólen. Na presente pesquisa, foi avaliada a influência do teor de água, do tempo e dos ambientes de armazenamento sobre a viabilidade e a germinação de grãos de pólen de milho. Os ensaios foram realizados nos Laboratórios de Análise de Sementes e de Biologia Molecular do setor de sementes e na área experimental do Departamento de Agricultura da UFLA. Nos pré-testes, foram verificados diferentes meios de cultura para avaliação da germinação in vitro, assim como o melhor horário de coleta dos grãos de pólen. Foi avaliada, ainda, a germinação dos grãos de pólen sob diferentes teores de água: 51,7%, 29,4%, 21,7%, 17,7% e 17,6%. Em um segundo experimento, os grãos de pólen, com teores de água de 51,7%, 29,4% e 21,7% foram armazenados em deep freezer (-86ºC), geladeira (4ºC) e em nitrogênio líquido (-193ºC) por quatorze e trinta dias. Após o armazenamento, a germinação e a viabilidade dos grãos de pólen foram avaliadas in vitro, em meio de cultura, e por meio do teste de tetrazólio, respectivamente. A viabilidade dos grãos de pólen armazenados, por 14 dias, com diferentes teores de água e ambientes de armazenamento, também foi testada in vivo, por meio de autofecundações, em plantas da linhagem Le-57 e do híbrido GNZ 2004, quando ambos apresentavam estilos-estigmas receptivos. Para a avaliação da germinação e da viabilidade dos grãos de pólen, foi seguido o delineamento inteiramente ao acaso, em esquema fatorial 2 (tempo de armazenamento) x 3 (teor de água de grãos de pólen) x 3 (ambientes de armazenamento), com quatro repetições. Nos pré-testes, maiores valores de germinação dos grãos de pólen foram observados em meio de cultura contendo 10% de sacarose, 0,03% de ácido bórico e 0,15% de cloreto de cálcio (M2) e quando a coleta foi realizada às 9 horas. A viabilidade dos grãos de pólen foi reduzida substancialmente abaixo de 21,7% de teor de água, indicando que os mesmos não toleram a dessecação. Para melhor conservação, durante o armazenamento, os grãos de pólen deverão ser secados até 21,7% de teor de água e armazenados em nitrogênio líquido.
Palavras-chave: Zea mays, armazenamento, germinação, tubo polínico.
CONSERVATION AND DETERMINATION OF THE VIABILITY
OF MAIZE POLLEN GRAIN
ABSTRACT - In maize breeding programs, factors related to receptivity length of stigma, longevity of pollen grain in the plant, differences in the period of blossoming among plants and conservations of the genetics resources are some aspects that reinforce the importance of pollen grains storage. In this research the influence of water tenor, period and storage environment were evaluated in regard to the viability and germination of maize pollen grains. The assays took place in laboratories of Analyses of Seed Molecular Biology of the seeds sector and in the experimental area of Agricultural Department of UFLA. In the pre-tests, different culture methods were verified to evaluate the in vitro germination as well the best time to collect the pollen grains. The germination pollen grains in different water tenors was also evaluated: 51,7%; 29,4%, 21,7%; 17,7%; 17%. In a second experiment the pollen grains with water tenors of 51,7%; 29,4%; 21,7% were stored in deep freezer (-86oC), fridge (4oC), and liquid nitrogen (-193oC) for 14 and 30 days. After the storage, the germination and viability of pollen grains were evaluated in vitro in culture medium and through the tetrazoilium test, respectively. The viability of stored pollen grain for 14 days in different water tenors and storage places/environment was also tested in vivo through auto fecundation in plants of Le-57 inbred lines and GNZ 2004 hybrid, when both showed receptive style-stigmas. For the evaluation of germination and viability of pollen grains, a completely randomized design was used, in factorial scheme 2 (period of storage) x 3 (water tenors of pollen grains) x 3 (places storage), with four repetitions. In the pre-tests higher values of germination of pollen grains were observed in culture medium containing 10% sucrose; 0,03% boric acid; 0,15% calcium chloride (M2), and when the collection took place at 9 a.m. the viability of pollen grains was reduced substantially below 21,7% of water tenor indicating they don’t tolerate the desiccation. For a better conservation during the storage, the pollen grains should be dried until 21,7% of water tenor and storage in liquid nitrogen.
Key words: Zea mays, storage, pollen grains, germination, pollen tubes.
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